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pET-44a大肠表达质粒 货号：P1113

信息

别名 pET44a
启动子 T7
复制子 pBR322
终止子 T7 terminator
质粒分类 大肠杆菌载体；PET系列表达质粒
质粒大小 7311bp
质粒标签 C-HSV, N-6×His, C-6×His, N-Thrombin, N-Nus, N-EK
原核抗性 Amp
克隆菌株 DH5α
培养条件 37℃
表达宿主 BL21(DE3)
培养条件 37℃，有氧，LB
诱导方式 IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物 T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物 T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
质粒宿主 大肠杆菌
质粒用途 蛋白表达
片段类型 基因CDS
片段物种 空载体
原核抗性 氨苄青霉素

简介
      pET44系列载体是设计用来克隆和高水平表达含有495个氨基酸的Nus标签的蛋白表达载体。与pET-43.1系列载体相比，pET44系列载体额外编码一个N端的His蛋白纯化标签。
      pET42a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面 是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。对pET44a载体的单链测序可以使用COLIDOWN primer.
把表达的基因插入到载体的PshAI或者SmaI限制性内切酶位点时，可以通过EK蛋白酶或者Thrombin蛋白酶将融合表达的Nus标签完全切除。


图谱


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