pRSFDuet-1大肠双表达质粒 货号：P1275
来源:
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作者:shhebio
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发布时间: 2017-12-06
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信息
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启动子
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T7
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复制子
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RSF
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终止子
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T7 terminator
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质粒分类
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大肠系列质粒；大肠其它质粒；大肠双框质粒
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质粒大小
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3829bp
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质粒标签
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N-6×His，C-S
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原核抗性
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Kan
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克隆菌株
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DH5α
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培养条件
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37℃
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表达宿主
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BL21(DE3)等大肠杆菌
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培养条件
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37℃，有氧，LB
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诱导方式
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IPTG或乳糖及其类似物
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5'测序引物
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ACYCDuetUP1-F(GGATCTCGACGCTCTCCCT) DuetUP2-F( TTGTACACGGCCGCATAATC)
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3'测序引物
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DuetDOWN1-R( GATTATGCGGCCGTGTACAA) T7-ter-R( TGCTAGTTATTGCTCAGCGG)
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备注
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同时表达两个外源蛋白
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质粒宿主
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大肠杆菌
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质粒用途
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蛋白表达
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片段类型
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基因CDS
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片段物种
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双框空载体
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pRSFDuet-1质粒是一种原核表达载体， N端含有一个6×His标签，C端含有一个S标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
该质粒还携带有RSF复制因子、lacI基因和氯霉素抗性基因。可以使这个pETDuet-1载体在一个适当的宿主菌株的coexpression 4目标基因插入MCS1的基因可以使用ACYCDuetUP1引物和DuetDOWN1引物进行测序。插入MCS2的基因可以用DuetUP2引物和T7进行排序。
pRSFDuet-1 is designed for the coexpression of two target ORFs. The vector contains two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7lac promoter and ribosome binding site (rbs). The vector also carries the RSF1030-derived RSF replicon, lacI gene and kanamycin resistance gene (KnR). This vector can be used in combination with pACYCDuet™-1 , pCDFDuet™-1 , and pETDuet™-1 in an appropriate host strain for the coexpression of 4 to 8 target proteins. ORFs inserted into MCS1 can be sequenced using the ACYCDuetUP1 Primer and DuetDOWN1 Primer . ORFs inserted into MCS2 can be sequenced using the DuetUP2 Primer and T7 Terminator Primer . Unique sites are shown on the circle map.
