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BL21-AI大肠杆菌表达菌株 货号:st043
BL21-AI大肠杆菌表达菌株 货号:st043
来源:
|
作者:
shhebio
|
发布时间:
2018-04-11
|
228
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|
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基因型:
F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) araB::T7RNAP-tetA
信息:
抗性:Tet
培养基:LB
菌株类别:大肠杆菌
培养条件:37℃,有氧,LB
质粒转化:42℃热激
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:用于蛋白表达
菌株简介:
BL21-AI是一种大肠杆菌表达菌株,来源于BL21菌株,是大肠杆菌B/r型菌株(E.coli B/r)。在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因,T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过L-阿拉伯糖或者葡萄糖来调节,但菌株不含有lon蛋白酶。BL21-AI菌株的最大蛋白表达量往往低于BL21(DE3)。BL21-AI是膜外蛋白酶ompT的缺陷型菌株,该酶的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
Brian Caliendo (Voigt 实验室)报道过pCP20质粒比较难于转化到这个感受态细胞中,而pCP20转化到其他菌株中都很正常,但是菌体原因未知。
使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。注意:即使不加葡萄糖,BL21-AI细胞的araBAD启动子下游的本底蛋白表达水平仍然很低,加入葡萄糖后能够进一步的降低本底蛋白的表达水平。
BL21-AI感受态细胞适用于任何以T7启动子为基础的表达载体,能够进行高水平的重组蛋白表达。
因为菌株体内的T7 RNA聚合酶水平能够进行有效调节,BL21-AI感受态细胞能够有效表达对其他BL21细胞有毒或生长抑制的蛋白。从BL21-AI菌株中获得目的重组蛋白产量,和其他BL21菌株产量相当。
建议选择该菌株进行蛋白表达的条件如下:
1、你在使用T7启动子载体(高拷贝或者低拷贝都可以)进行蛋白表达。
2、使用其他BL21进行蛋白表达时,你观察到明显的细菌生长的抑制作用。3、你在表达一个已知的毒性蛋白
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