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Y1HGold酵母单杂交菌株 货号:st086
Y1HGold酵母单杂交菌株 货号:st086
来源:
|
作者:
shhebio
|
发布时间:
2018-04-12
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1305
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基因型:
MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1
信息:
培养基:YPDA
菌株类别:酵母菌
培养条件:28℃,有氧,YPDA
质粒转化:电转
保存方式:30%甘油,-20℃
基本应用:酵母单杂交
菌株简介:
Y1HGold菌株是Clontech公司开发的GAL4-AbA酵母单杂系统用菌株,MATα型,可直接转化质粒进行筛库试验。Transformation marker为: ura3,leu2;报告基因为:AbAr。Y1HGold -GAL4-AbA酵母单杂系统需要两种质粒配套使用:pAbAi和PGADT7。质粒pAbAi的筛选标志为URA,用于表达 pBait-AbAi construct (1~3个bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi中);质粒PGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4-AbA酵母单杂系统原理:Aureobasidin A (AbA)是一种环酯肽抗生素,在低浓度(0.1-0.2ug/ml) 下即可对酵母产生毒性。基因组中整合了pBait-AbAi 的酵母菌株(Bait-Reporter Yeast Strains),当猎物蛋白(Prey)结合到诱饵序列(Bait DNA)上,GAL4 AD就会激活AbAr 的表达,从而能够在含有抗生素AbA的培养基上生长。AbAr与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点,可以降低酵母单杂假阳性发生的概率。在28℃有氧的条件下,Y1HGold菌株在无抗性的YPDA上生长,使用30%的甘油可保藏菌种
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