分子克隆和质粒载体构建

  分子克隆是指在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，
用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入
适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，
可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。

  载体构建是分子生物学研究中最常用的实验技术。为把DNA分子运送到受体细胞中去，
必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运
载体是质粒(plasmid)，在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体

本公司可以根据您的实验要求为您完成分子克隆和载体构建及改造的任务。

一、载体构建的基本实验步骤

(1)目的DNA片段和载体的制备；

(2)目的DNA片段和载体的连接；

(3)连接产物的转化；

(4)克隆筛选。

(5)测序验证及结果交付；

二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建，如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体、报告基因载体、细菌表达载体 、穿梭质粒等；
2、基因定点突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；
3、载体元件替换和改造；
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建；
5、过表达载体构建。