云南中医药大学中药学院在国际药学研究发志发表的文献
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作者:shhebio
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发布时间: 2021-05-14
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使用本公司构建的质粒的文献
摘要 目的 在大肠杆菌中异源表达和纯化人源Parkin蛋白。方法 构建带有人源Parkin基因的克隆载体,测序保证
Parkin基因序列正确后,构建异源表达载体pET-28a/Parkin;在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导人源Parkin蛋白过表达,采用
镍亲和色谱纯化人源Parkin蛋白,用Western印迹(WB)和荧光分光光度法评价人源Parkin蛋白活性。结果 人源Parkin蛋白
在E. coli BL21(DE3)中获高表达,经镍亲和色谱纯化后除去了大量杂蛋白,得到富集;WB和荧光分光光度法检测均证实异源
表达的人源 Parkin 蛋白具有生物活性。结论 通过异源表达技术获得高纯度的且具有生物活性的人源 Parkin 蛋白,可用于
Parkin调节剂的快速筛选与研究。
[关键词] Parkin;泛素化;异源表达;蛋白纯化;检测活性
[中图分类号] Q71 [文献标志码] A [文章编号] 1674-0440(2020)12-1146-06
DOI:10.13220/j.cnki.jipr.2020.12.017
http://www.doc88.com/p-00099892449898.html