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pET-25b大肠表达质粒 货号：P1079

信息

别名 pET25b
启动子 T7
复制子 pBR322
终止子 T7 terminator
质粒分类 大肠杆菌质粒；大肠表达质粒；pET系列质粒
质粒大小 5547bp
质粒标签 N-pelB, C-HSV, C-6×His
原核抗性 Amp
克隆菌株 DH5α
培养条件 37℃
表达宿主 BL21(DE3)等大肠杆菌
培养条件 37℃，有氧，LB
诱导方式 IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物 T7（TAATACGACTCACTATAGGG）
3'测序引物 T7-ter（TGCTAGTTATTGCTCAGCGG）
备注 分泌表达
质粒宿主 大肠杆菌
质粒用途 蛋白表达
片段类型 基因CDS
片段物种 空载体
原核抗性 氨苄青霉素

简介
        pET-25b质粒是一种原核表达载体，C端含有一个6×His标签、HSV标签，N端含有一个pelB前导肽。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。pET25b载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。
        pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。

图谱



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