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pCold-GST大肠表达质粒 货号：P1173

信息

别名 pColdGST
启动子 CSPA
复制子 pBR322
质粒分类 大肠杆菌载体；pCold系列表达质粒
质粒大小 5097bp
质粒标签 N-GST, N-HRV 3C蛋白酶切位点,N-His
原核抗性 Amp
克隆菌株 DH5α
培养条件 37℃
表达宿主 大肠杆菌
培养条件 37℃，有氧，LB
诱导方式 IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物 pCold Forward: 5-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3
3'测序引物 pCold Reverse 5-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3
备注 pCold-GST载体表达GST融合蛋白，GST标签可以提高目的蛋白的可溶性，提高目的蛋白的纯度。
质粒宿主 大肠杆菌
质粒用途 蛋白表达
片段类型 基因CDS
片段物种 空载体
原核抗性 氨苄青霉素

简介
pCold GST DNA在冷休克载体的基础上，整合了来源于Schistosoma japonicum的谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases, GST)可溶性标签。通过GST在目的蛋白质N末端的融合表达，可提高融合蛋白质的稳定性和可溶性。本制品在cspA启动子的下游插入了5’非编码区（5’-UTR）、翻译增强元件（TEE）、His标签、GST标签和多克隆位点（MCS）（下图）。此外，在cspA启动子下游还插入了可以严格调控目的基因表达的lac operator。GST标签融合蛋白质可进行高亲和性纯化。在GST标签和多克隆位点（MCS）之间插入了高特异性HRV 3C Protease 的识别序列，可从融合蛋白质中去除标签。HRV 3C Protease的最适温度为4～5℃，可以在温和的条件下进行目的蛋白质的标签去除反应。pCold 系列载体的启动子是大肠杆菌来源的，所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。


图谱



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