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pVAX1哺乳表达质粒 货号:P2357

信息

启动子 CMV
复制子 pUC
终止子 BGH poly(A)signal
质粒分类 哺乳细胞载体;蛋白过表达质粒
质粒大小 2999bp
原核抗性 Kan
克隆菌株 DH5α
培养条件 37℃
表达宿主 哺乳细胞293T
培养条件 37℃,5%CO2
诱导方式 无需诱导
5'测序引物 CMV-F: CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'测序引物 BGH-R: TAGAAGGCACAGTCGAGG
备注 真核表达
质粒宿主 哺乳细胞
质粒用途 蛋白表达
片段类型 基因CDS
片段物种 空载体
原核抗性 卡那霉素


简介
本载体的特征是允许在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行高拷贝复制和在哺乳动物(mammal;mammalian)细胞中高水平的瞬时表达蛋白。载体包含下列元素:
       •人巨细胞病毒(CMV)立即早期启动子,使得本载体可以在大部分的哺乳动物(mammal;mammalian)细胞中进行高水平基因表达

       •牛生长激素(BGH)多聚腺苷酸化信号能够保证高效的转录终止和mRNA的poly A结构。
       •在大肠杆菌(Escherichia coli)中是用卡那抗性进行修改载体筛选。
       •质粒pVAX1/lacZ是用来作为细胞系目的基因转染和表达的阳性对照。

pVAX1是在载体pcDNA3.1的基础上改建而成的一种新型真核表达载体,大小为3.0 kb。该质粒用卡那霉素抗性筛选基因替代pcDNA3.1中的氨卞霉素抗性筛选基因,最大程度地减少抗性筛选基因和人类基因组发生重组的可能性。


pVAX1含有多个克隆酶切位点允许同时克隆多个大片段的目的基因,强启动子pCMV和BGH poly A信号可以在哺乳动物细胞中高水平表达重组蛋白。pVAX1又是一种非融合载体,要求插入序列中时必须包含一段KozaK的翻译起始序列和一个起始密码子(ATG)以引导正确的翻译,典型的KozaK共有序列为“ANNATGG”,其-3位的A和+4位的G对正确插入甚为关键,在插入序列中还需包括一个终止密码子以正确终止基因表达。


pVAX1是由美国食品和药品管理委员会(FDA)推荐的唯一可以应用于人体实验的载体质粒。迄今为止,关于pVAX1的研究已涉及动物和临床试验




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