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pET-42c大肠表达质粒 货号:P1109
pET-42c大肠表达质粒 货号:P1109
来源:
|
作者:
shhebio
|
发布时间:
2017-12-06
|
156
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|
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信息
启动子:
T7/lac
复制子:
ColE1 ori,F1 ori
终止子:
T7 terminator
质粒分类:
大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
质粒大小:
5931bp
质粒标签:
N-GST, N-6×His, N-S, C-6×His, N-Thrombin, N-Factor Xa
原核抗性:
卡那霉素Kan
克隆菌株:
DH5α
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
BL21(DE3)
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物:
T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
简介
pET42系列载体是用来进行克隆和高水平表达含有220个氨基酸的GST融合纯化标签的蛋白表达载体。
pET42a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。
把表达的基因插入到载体的PshAI限制性内切酶位点时,可以通过Factor Xa蛋白酶将融合表达的GST标签完全切除。
图谱
garmin 230