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pET-50b大肠表达质粒 货号:P1120

信息

别名 pET50b
启动子 T7
复制子 pBR322
终止子 T7 terminator
质粒分类 大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
质粒大小 6733bp
质粒标签 N-Nus, N-6×His, N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin
原核抗性 Kan
克隆菌株 DH5α
培养条件 37℃
表达宿主 BL21(DE3)
培养条件 37℃,有氧,LB
诱导方式 IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物 T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物 T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
质粒宿主 大肠杆菌
质粒用途 蛋白表达
片段类型 基因CDS
片段物种 空载体
原核抗性 氨苄青霉素


简介
      pET50b载体携带有N端的Nus标签和His纯化标签,紧跟着这些标签的有一个HRV3C蛋白酶切位点。这个HRV3C蛋白酶切位点能够特异性的高效切割 “LEVLFQ↓GP”氨基酸序列,酶活力在低温下很强。pET-50b(+)载体上还含有一个可选择的C端Thrombin蛋白酶切位点和S标签序列。
      载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。



图谱


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