pCold-SUMO大肠表达质粒 货号：P1170
来源:
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作者:shhebio
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发布时间: 2017-12-06
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信息
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别名
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pColdSUMO
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启动子
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CSPA
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复制子
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pBR322
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质粒分类
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大肠系列质粒；大肠表达质粒；pCold系列质粒
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质粒大小
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4740bp
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质粒标签
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N-His, N-SUMO
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原核抗性
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Amp
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克隆菌株
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DH5α
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培养条件
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37℃
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表达宿主
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BL21等大肠杆菌
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培养条件
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37℃，有氧，LB
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诱导方式
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IPTG或乳糖及其类似物
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5'测序引物
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pCold-F（ACGCCATATCGCCGAAAGG）
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3'测序引物
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pCold-R（GGCAGGGATCTTAGATTCTG）
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备注
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冷休克表达载体
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质粒宿主
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大肠杆菌
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质粒用途
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蛋白表达
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片段类型
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基因CDS
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片段物种
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空载体
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原核抗性
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氨苄青霉素
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简介
原核表达载体(pCold-SUMO)是在 pCold 载体基础上改造而成，该载体启动子(CS Promoter)来源于南极嗜冷细菌，在低温下(15 度)才能启动蛋白的表达。低温下细菌生长缓慢，使得蛋白合成速度减慢，从而最大限度的提高了蛋白正确折叠的几率，提高了蛋白可溶性表达，增强了活性蛋白的表达比率。该表达系统所包含的 SUMO tag可以极大地提高小分子量蛋白的表达量，而且进一步提高了蛋白的可溶表达几率。同时，试剂盒配备的SUMO Protease(含6×His标签)可特异性去除 SUMO tag，从而得到不含任何标签的重组蛋白。TEE信号肽可增强冷启动子调控下目的蛋白的高表达。BL21(DE3)Chaprone E.coli 细菌中含有分子伴侣蛋白质粒，其表达产物可协助重组蛋白正确折叠形成可溶活性蛋白。分子伴侣蛋白质粒为氯霉素抗性（chloramphenicol，Cmr）的表达受控于四环素（tetR）操纵子。
pCold-SUMO质粒是利用冷休克基因CSPA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在E.COLI启动子下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5’非翻译区（5’UTR），翻译增强元件（TEE）,His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时，大肠杆菌暂时停止生长，大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少，但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。
图谱
