pCDFDuet-1大肠双表达质粒 货号：P1276
来源:
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作者:shhebio
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发布时间: 2017-12-06
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信息
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启动子 |
T7 |
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复制子 |
CDF |
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终止子 |
T7 terminator |
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质粒分类 |
大肠系列质粒；大肠其它质粒；大肠双框质粒 |
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质粒大小 |
3781bp |
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质粒标签 |
N-6×His,C-S |
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原核抗性 |
Str |
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克隆菌株 |
DH5α |
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培养条件 |
37℃ |
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表达宿主 |
BL21(DE3) |
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培养条件 |
37℃，有氧，LB |
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诱导方式 |
IPTG或乳糖及其类似物 |
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5'测序引物 |
ACYCDuetUP1：GGATCTCGACGCTCTCCCT
DuetUP2:TTGTACACGGCCGCATAATC |
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3'测序引物 |
DuetDOWN1:GATTATGCGGCCGTGTACAA
T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
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备注 |
同时表达两个外源蛋白 |
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质粒宿主 |
大肠杆菌 |
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质粒用途 |
蛋白表达 |
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片段类型 |
基因CDS |
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片段物种 |
双框空载体 |
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简介 pCDFDuet-1质粒是一种原核表达载体， N端含有一个6×His标签，C端含有一个S标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。该质粒还携带有CloDF13复制因子、lacI基因和链霉素抗性基因。可以使这个pETDuet-1载体在一个适当的宿主菌株的coexpression 4目标基因插入MCS1的基因可以使用ACYCDuetUP1引物和DuetDOWN1引物进行测序。插入MCS2的基因可以用DuetUP2引物和T7进行排序。
pCDFDuet-1 is designed for the coexpression of two target ORFs. The vector contains two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7lac promoter and ribosome binding site (rbs). The vector also carries the CloDF13-derived CDF replicon, lacI gene and streptomycin/spectinomycin resistance gene (SmR). This vector can be used in combination with pACYCDuet™-1 , pRSFDuet™-1, and pETDuet™-1 in an appropriate host strain for the coexpression of 4 to 8 target proteins. ORFs inserted into MCS1 can be sequenced using the ACYCDuetUP1 Primer and DuetDOWN1 Primer . ORFs inserted into MCS2 can be sequenced using the DuetUP2 Primer and T7 Terminator Primer . Unique sites are shown on the circle map.
图谱
